​

 ​

بهترين نكات كاربردي براي هودهاي ميكروبي كلاس2

سلول هاي خود را سالم و شاد نگه داريد

در ايجاد يك “حباب” حياتي در يك محيط آزمايشگاهي متخاصم، هودهاي ميكروبي كلاس2 از كارگران، محيط زيست و فرآيندهاي مربوط به سلول‌ها يا بافت‌هاي بيولوژيكي محافظت مي‌كنند.

اولين نكته كاربردي كه بيشتر متوجه شيميدانان و دانشمندان تحليلي است، اين است كه هودهاي ميكروبي كلاس2 كه هودهاي شيمي نيستند. جريان هوا در هودها قوي تر است و از محصولات يا فرآيندها در برابر هواي محيط و آلاينده هاي فراوان آن محافظت نمي كند. هودهاي شيمي نيز به بيرون منفجر مي شوند، در حالي كه هودهاي ميكروبي كلاس2 ممكن است هواي آزمايشگاه را از طريق فيلتر HEPA تخليه يا بازيافت كنند و هواي پاك شده را به آزمايشگاه بازگردانند. دانستن نوع حفاظت مورد نياز براي محصول، فرآيند و كارگر، كليد انتخاب هودهاي ميكروبي كلاس2مناسب است.

تو روي نيمكت نيستي!

اگر از آنها خواسته شود، اكثر كاربران متوجه خواهند شد كه فضاهاي داخل هودهاي ميكروبي كلاس2 به طور بالقوه خطرناك هستند. با اين حال، جف سرل، معاون ارشد در Germfree (اورموند بيچ، فلوريدا)، هشدار مي دهد كه رضايت به راحتي جايگزين احتياط مي شود. آگاه باشيد كه در يكهود ميكروبي  كار مي كنيد و نه روي نيمكت يا پشت ميز خود. كارتان را طوري برنامه‌ريزي كنيد كه وقتي مشكلاتي پيش مي‌آيد بتوانيد اتفاقات داخل هود را كنترل كنيد.»

كاربران بايد بدانند كه ويژگي اصلي ايمني در همه هودهاي ميكروبي كلاس2 جريان هواي داخل است. برخلاف هودهاي شيمي كه فقط هوا را از ناحيه تنفس اپراتور مي كشند يا از آن دور مي كنند، هودهاي ميكروبي كلاس2 بايد هواي جريان پايين فيلتر شده HEPA را نيز متعادل كنند. سرل مي‌گويد: «اين تعادل مي‌تواند تحت‌تاثير جايگاهي كه كاربران مي‌ايستند يا حركات آن‌ها قرار مي‌گيرد.

دوون كرامر، متخصص فروش در اير ساينس (فورت مايرز، فلوريدا)، خاطرنشان مي‌كند كه حتي «قرار دادن هود هاي ميكروبي در داخل يك اتاق براي اطمينان از جريان هواي بهينه ضروري است». برنامه ريزي كاري بايد شامل هر مرحله از يك گردش كار يا آزمايش، از جمله نحوه رسيدگي به زباله و جلوگيري از آلودگي متقابل باشد. Serle بسته به دست تكنسين (از چپ به راست يا بالعكس) از «تميز به كثيف» يا «كثيف به تميز» پيشنهاد مي‌كند. “به طور معمول، كثيف براي تميز كردن در جهت چپ به راست است، بنابراين مواد و تجهيزات هرگز نبايد در جهت مخالف حركت كنند، از راست به چپ.”

اجتناب از آلاينده هاي موجود در هوا

هودهاي ميكروبي كلاس2 با تصفيه هواي غير استريل محيط آزمايشگاه از طريق فيلتراسيون HEPA كار مي كنند. سپس هواي تصفيه شده به سمت پايين، به سمت محصول يا فرآيند روي سطح كار هودهاي ميكروبي كلاس 2  دميده مي شود. از آنجايي كه محصول يا فرآيند ممكن است اين هوا را آلوده كرده باشد، قبل از تخليه به خارج يا برگشت به آزمايشگاه از فيلتر دوم HEPA عبور مي كند. بنابراين، به عنوان يك نكته كلي، آزمايشگاه ها بايد آن فيلترها را حفظ كنند و اطمينان حاصل كنند كه جريان هوا در حد مشخصات باقي مي ماند.

دكتر دانيل آيزنمن، مدير خدمات ايمني زيستي در Advarra (پارك مثلث تحقيقاتي، NC) مي گويد: «محققان اغلب تصور مي كنند كه كار در يك هودهاي ميكروبي كلاس2 محيط كاري استريل را تضمين مي كند. با اين حال، هود فقط از آلاينده هاي ذرات معلق در هوا محافظت مي كند.

براي جلوگيري از اكثر منابع آلودگي، آيزنمن نكات زير را ارائه مي دهد:

• سطوح كار را قبل و بعد از كار ضد عفوني كنيد تا آلودگي سطح را به حداقل برسانيد يا از بين ببريد
• اطمينان حاصل كنيد كه مواد وارد شده به هود ضد عفوني يا استريل شده باشند
• براي جلوگيري از ايجاد آلودگي از پوست محقق، هر جا مناسب است از تجهيزات حفاظت فردي استفاده كنيد. “انسان دائما در حال ريختن سلول هاي پوستي است كه با باكتري پوشانده شده است”
• براي جلوگيري از ايجاد آلودگي با تكنيك آسپتيك آشنا شويد
• از مسدود كردن گريل هاي ورودي هوا در جلو و پشت سطح كار خودداري كنيد، زيرا ممكن است جريان هوا را مختل كند.
• هودهاي ميكروبي كلاس2 سطل هاي ذخيره سازي نيستند! از نگهداري مواد در هود كه ممكن است جريان هوا را مختل كند خودداري كنيد
• دستكش ها را هر زمان كه سطوح غير استريل خارج از هودهاي ميكروبي كلاس2 را لمس كردند، ضدعفوني كنيد يا سطوح تماس را پردازش كنيد
• تصور نكنيد نور UV هود به طور موثر سطح كار هود را ضد عفوني مي كند. بسياري از هودهاي ميكروبي كلاس2  مجهز به واحدهاي ضد عفوني كننده اشعه ماوراء بنفش هستند، اما UV جايگزين تكنيك آسپتيك و گندزدايي كامل نيست. UV قابليت نفوذ ضعيفي براي ضدعفوني مايع يا جامداتي دارد كه ممكن است از آلاينده‌هاي ميكروبي محافظت كند.
• هودهاي ميكروبي كلاس2 را دور از درها و مناطق پرتردد قرار دهيد تا از جريان هواي آشفته اي كه با جريان هواي داخل هود تداخل مي كند جلوگيري كنيد.
• از شعله هاي باز كه ممكن است جريان هوا را نيز در داخل كاپوت مختل كند، خودداري كنيد. “فيلترهاي هپا آتش گرفتن شناخته شده اند”
• از استفاده از مواد شيميايي فرار يا خطرناك در هودهاي ميكروبي كلاس2خودداري كنيد. متداول ترين هودهاي ميكروبي كلاس2 (كلاس II، نوع A2) 70 درصد به داخل اتاق باز مي گردند و در برابر بخارات شيميايي محافظت صفر مي كنند.

فقط به اندازه كاربر ايمن است

“علاوه بر اين، به ياد داشته باشيد كه هودهاي ميكروبي كلاس2 بايد پس از نصب، سالانه و پس از تعمير، گواهينامه دريافت كنند. آيزنمن مي افزايد: گواهي نامه هاي معتبر بنياد ملي بهداشت (NSF) عملكرد را در چارچوب پارامترهاي مشخص شده توسط سازنده و استاندارد NSF49 براي هودهاي ميكروبي كلاس2 تضمين مي كنند.

مانند هر عمليات آزمايشگاهي، ايمني نگراني اصلي هنگام كار با هودهاي ميكروبي كلاس2 است. راجر پونز، مدير محصول در Telstar (بريستول، PA)، خاطرنشان مي‌كند كه كار هودهاي ميكروبي كلاس2 اغلب شامل خطرات زيستي است، بنابراين «صرف نظر از عاملي كه كاربر با آن كار مي‌كند، هودهاي ميكروبي كلاس2 فقط به اندازه فردي كه آن را اداره مي‌كند ايمن است. كاربران بايد از برنامه‌هاي نگهداري و صدور گواهينامه پيروي كنند و كابينت را از طريق پروتكل‌هاي تميز كردن تعيين‌شده تميز يا ضدعفوني كنند. علاوه بر اين، Pons از كاربران مي‌خواهد كه زباله‌ها را از ريختن زباله‌ها در يك كيسه خطرات زيستي در داخل كابينت نگه دارند، نه بيرون از آن. ريزش ها را با يك حوله ضدعفوني كننده بپوشانيد تا از آئروسل شدن جلوگيري شود و به ماده ضدعفوني كننده زمان بدهيد تا كار كند. پس از تميز كردن، بسته به ماده ضد عفوني كننده، بايد از يك آبكش استريل براي جلوگيري از خوردگي فولاد ضد زنگ داخل كابينت استفاده شود.

بس است

اسكات آلدرمن، مدير عمليات در موسسه واكسن انساني دوك (چپل هيل، NC)، به مديران آزمايشگاه توصيه مي كند كه بيش از نياز خود هودهاي ميكروبي كلاس2 خريداري نكنند و تصميمات را بر اساس درك خطرات ناشي از كار خود قرار دهند. بيشتر فعاليت‌هايي كه در آزمايشگاه‌هاي تحقيقاتي باليني يا زيست‌پزشكي انجام مي‌شوند به هودهاي ميكروبي كلاس2 كلاس II نوع A2 نياز دارند. افزودن يك اتصال سايبان به سيستم اگزوز ساختمان يا خريد هودنوع B بدون دليل موجه هزينه ها را افزايش مي دهد و احتمالاً خطر خرابي هو.د  را افزايش مي دهد.

Alderman همچنين در هودهاي ميكروبي كلاس2 تاييد كننده آزمون ميداني، بر اساس استاندارد NSF/ANSI 49 ، قبل از استفاده اوليه و حداقل ساليانه پس از آن، بسيار كارآمد است. عملكرد مناسب هود ميكروبي كلاس2 مستلزم متعادل كردن جريان هوا در سراسر دستگاه است. تأييد عملكرد مناسب پس از نصب بسيار مهم است زيرا «محموله و تحويل يك هود ميكروبي كلاس2 را در معرض شوك و ارتعاشاتي قرار مي‌دهد كه مي‌تواند به يكپارچگي دستگاه آسيب برساند. آزمايش ميداني تنها راه براي اطمينان از اينكه يك واحد مطابق طراحي عمل مي كند است.

​

هود ميكروبي يا هود لامينار كلاس 2 چيست و در چه مواردي استفاده مي شود؟

هود لامينار كلاس 2 يك ايستگاه كاري سرپوشيده است كه براي ايجاد يك محيط كاري بدون آلودگي از طريق فيلترها براي جذب تمام ذرات وارد شده به هود ميكروبي يا هود كلاس 2 استفاده مي شود.

• اين هودهاي لامينار براي محافظت از كار در برابر محيط طراحي شده اند و بيشترين كاربرد را براي توزيع آسپتيك رسانه هاي خاص و ريختن صفحه دارند.
• هود لامينار كلاس 2 مشابه هود لامينار كلاس 1 هستند با تنها تفاوت اين كه در هود كلاس 2، هواي خروجي به داخل صورت كاربر كشيده مي شود.
• در هود كلاس 1، هم نمونه و هم كاربر محافظت مي شوند، در حالي كه در هود كلاس 2، فقط نمونه محافظت مي شود و نه كاربر.

اجزاء / قطعات هود كلاس 2 يا هود اتاق تميز

هود اتاق تميز از قسمت هاي زير تشكيل شده است:

1. كابينت

• كابينت از فولاد ضد زنگ ساخته شده است كه شكاف يا اتصالات كمتري دارد يا از جمع شدن هاگ جلوگيري مي كند.
• كابينت محيط داخلي ايجاد شده در داخل لامينار را عايق مي كند و از محيط بيرون محافظت مي كند.
• قسمت جلويي كابينت داراي محافظ شيشه اي است كه در برخي از هود هاي لامينار به طور كامل باز مي شود و يا در برخي داراي دو دهانه براي ورود دستان كاربر به داخل هود است.

1. فضاي كاري هود كشت سلولي يا كلاس 2

• يك فضاي كاري مسطح در داخل كابينت وجود دارد تا تمام فرآيندها انجام شوند.
• صفحات كشت، مشعل و حلقه ها همگي در فضاي كاري كه در آن عمليات انجام مي شود قرار مي گيرند.
• ميز كار نيز از فولاد ضد زنگ براي جلوگيري از زنگ زدگي ساخته شده است.

1. پد فيلتر هود لامينار

• يك پد فيلتر در بالاي كابينت وجود دارد كه هوا از طريق آن به داخل كابينت مي رود.
• پد فيلتر ذرات گرد و غبار و برخي ميكروب ها را از ورود به محيط كار داخل كابينت به دام مي اندازد.

1. فن هود لامينار

• يك فن در زير صفحه فيلتر وجود دارد كه هوا را مي مكد و آن را در كابينت حركت مي دهد.
• اين فن همچنين به حركت هوا به سمت فيلتر HEPA (فيلتر هپا) اجازه مي دهد تا ميكروب هاي باقي مانده در هنگام عبور از فيلتر به دام بيفتند.

1. لامپ UV هود لامينار عمودي

• برخي از هودهاي لامينار كلاس 2 ممكن است داراي يك لامپ ميكروب كش UV باشند كه قبل از عمل، داخل كابينت و محتويات آن را استريل مي كند.
• لامپ UV بايد 15 دقيقه قبل از عمل روشن شود تا از قرار گرفتن در معرض UV به سطح بدن كاربر جلوگيري شود.

1. لامپ فلورسنت هود لامينار عمودي

• لامپ فلورسنت در داخل كابينت قرار مي گيرد تا نور مناسب در حين كار تامين شود.

1. فيلتر هپا هود ميكروبيولوژيكي

• فيلتر هواي ذرات با راندمان بالا در داخل كابينت وجود دارد كه محيط را براي عمليات استريل تر مي كند.
• هواي از پيش فيلتر شده از فيلتر عبور مي كند كه قارچ ها، باكتري ها و ساير ذرات گرد و غبار را به دام مي اندازد.
• فيلتر شرايط استريل داخل هود آزمايشگاهي را تضمين مي كند و در نتيجه احتمال آلودگي را كاهش مي دهد.

اصل/ كار هود لامينار كلاس 2

• اصل هود كلاس 2 بر اساس جريان آرام هوا از طريق كابينت است.
• اين دستگاه با استفاده از جريان هوا به داخل از طريق يك يا چند فيلتر HEPA براي ايجاد محيطي عاري از ذرات كار مي كند.
• هوا از طريق يك سيستم فيلتراسيون گرفته مي شود و سپس به عنوان بخشي از جريان آرام هوا در سراسر سطح كار تخليه مي شود.
• هوا ابتدا از لايه فيلتر يا پيش فيلتر عبور مي كند كه اجازه مي دهد جريان هوا به داخل كابينت جريان يابد.
• سپس فن هوا را به سمت فيلترهاي HEPA هدايت مي كند.
• سپس فيلترهاي HEPA باكتري‌ها، قارچ‌ها و ساير مواد ذرات معلق را به دام مي‌اندازند تا هواي خارج شده از آن هواي بدون ذرات باشد.
• سپس مقداري از هواي خروجي از سوراخ‌هاي موجود در انتهاي پاييني هود عبور مي‌كند، اما بيشتر آن از روي فضاي كار عبور مي‌كند در حالي كه از كابينت به سمت صورت اپراتور خارج مي‌شود.
• هود لامينار عمودي در طرفين محصور شده است و فشار هواي مثبت ثابت براي جلوگيري از نفوذ هواي خارجي آلوده به داخل كابينت حفظ مي شود.

مراحل اجراي هود كشت سلولي يا هود كلاس 2

روشي كه بايد هنگام كار با هود كلاس 2 دنبال شود در زير آورده شده است:

1. قبل از اجراي هود كشت سلولي، كابينت بايد بررسي شود تا اطمينان حاصل شود كه هيچ چيز مستعد در برابر اشعه ماوراء بنفش در داخل كابينت وجود ندارد.
2. سپس محافظ شيشه اي هود بسته مي شود و نور UV روشن مي شود. نور UV بايد حدود 15 دقيقه روشن بماند تا از استريل شدن سطح ميز كار اطمينان حاصل شود.
3. سپس نور ماوراء بنفش خاموش مي شود و مدت زماني حدود 10 دقيقه قبل از روشن شدن جريان هوا صرف مي شود.
4. حدود 5 دقيقه قبل از شروع عمليات، جريان هوا روشن مي شود.
5. سپس محافظ شيشه باز مي شود و چراغ فلورسنت نيز در حين كار روشن مي شود.
6. براي اطمينان از محافظت بيشتر، ميز كار كابينت را مي توان با ضد عفوني كننده هاي ديگر مانند الكل 70 درصد استريل كرد.
7. پس از اتمام كار، جريان هوا و لامپ فلورسنت هر دو بسته مي شوند و محافظ شيشه اي نيز بسته مي شود.

انواع كابينت جريان لامينار

بسته به جهت حركت هوا، كابينت هاي جريان آرام به دو نوع تقسيم مي شوند:

1. هود لامينار عمودي

• در هود لامينار عمودي، هوا از بالاي كابينت مستقيماً به سمت پايين كابينت حركت مي كند.
• يك ميز كار جريان هواي عمودي به عمق و فضاي كف به اندازه يك هود جريان هواي افقي نياز ندارد كه آن را قابل كنترل تر مي كند و احتمال انسداد جريان هوا يا حركت هواي آلوده به پايين دست را كاهش مي دهد.
• هود لامينار عمودي نيز ايمن‌تر در نظر گرفته مي‌شود، زيرا هوا را مستقيماً به سمت فردي كه آزمايش‌ها را انجام مي‌دهد دميده نمي‌شود.

1. هود لامينار افقي

• در هود لامينار افقي، هواي اطراف از پشت ميز كار مي آيد كه سپس توسط دمنده به سمت فيلترهاي HEPA پخش مي شود.
• سپس هواي فيلتر شده در جهت افقي به محيط محل كار تخليه مي شود.
• يكي از مزاياي اين هود اين است كه جريان هوا به موازات محل كار، محيط را با سرعت ثابتي تميز مي كند.
• هواي شوينده مستقيماً به اپراتور برخورد مي كند كه ممكن است سطح امنيتي اين نوع هودهاي لامينار را كاهش دهد.

موارد استفاده از هود لامينار

موارد زير برخي از كاربردهاي رايج هود لامينار در آزمايشگاه است:

1. هودهاي آزمايشگاهي در آزمايشگاه ها براي فرآيندهاي حساس به آلودگي مانند كشت بافت گياهي استفاده مي شوند.
2. ساير فرآيندهاي آزمايشگاهي مانند آماده سازي صفحه رسانه و كشت ارگانيسم ها را مي توان در داخل هود انجام داد.
3. عمليات دستگاه هاي الكترونيكي حساس به ذرات در داخل هود انجام مي شود.
4. در صنايع داروسازي، تكنيك‌هاي آماده‌سازي دارو نيز در داخل هود انجام مي‌شود تا از محيطي عاري از ذرات در طول عمليات اطمينان حاصل شود.
5. هود هاي لامينار را مي توان به صورت سفارشي براي برخي از كارهاي تخصصي ساخت و همچنين مي تواند براي تكنيك هاي آزمايشگاهي عمومي در بخش هاي ميكروبيولوژيكي و همچنين صنعتي استفاده شود.

موارد احتياط

هنگام كار با هود آزمايشگاهي، موارد زير بايد در نظر گرفته شود:

1. هود لامينار بايد قبل و بعد از عمل با نور UV استريل شود.
2. نور UV و جريان هوا نبايد همزمان استفاده شوند.
3. هنگام روشن شدن لامپ UV، هيچ عملياتي نبايد انجام شود.
4. اپراتور بايد لباس آزمايشگاهي و دستكش بلند بپوشد.
5. فضاي كار، محافظ شيشه اي و ساير اجزاي موجود در داخل هود بايد قبل و بعد از اتمام كار استريل شوند.